Иммуногистохимия

Иммуногистохимия (ИГХ) — метод микроскопического исследования тканей, в основе которого лежит принцип специфического взаимодействия тканевых и клеточных антигенов с антителами, несущими на себе различные метки.

В качестве меток могут использоваться:

• флуоресцентные красители (родамин, флюоресцеин и др.);
• ферменты (щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена и др.);
• биотин (водорастворимый витамин группы B);
• радиоизотопы;
• электронно-плотные частицы (ферритин, коллоидное золото).

Впервые метод ИГХ в диагностике был применён в 1941 году Альбертом Кунсом, который использовал антитела, меченные флюоресцеином.

Сегодня иммуногистохимические методы исследования имеют важное значение в диагностике онкологических заболеваний, в том числе, и в ветеринарной медицине. В 1994 году были проведены исследования 20000 низкодифференцированных новообразований методом ИГХ, в ходе которых было установлено, что первоначальные диагнозы лимфом, рака, сарком, меланом и других опухолей были ошибочными в 50% случаев.

Метод ИГХ позволяет:

• диагностировать опухоли,
• устанавливать нозологический вариант опухолей,
• выявлять первичный опухолевый очаг по метастазам,
• обнаруживать злокачественную трансформацию клеток,
• делать прогноз относительно течения онкологического заболевания и возможностей прицельной терапии опухоли,
• выявлять резистентность клеток опухоли к лучевой терапии и химическим препаратам.

Для обнаружения опухолей и метастаз у собак, кошек и других животных используется большое количество маркеров. Это позволяет максимально точно диагностировать заболевание и ход его развития. После иммуногистохимического исследования онколог получает заключение с положительными и отрицательными маркерами, что помогает врачу подтвердить или опровергнуть предположения других клинико-лабораторных исследований.

Для проведения качественного исследования и назначения лечения животному при онкологических заболеваниях требуется обязательное использование иммуногистохимии.

Кроме того, метод ИГХ применяется для определения гормонов и рецепторов к ним, изучения синтетических и секреторных процессов, идентификации различных микроорганизмов (бактерий, вирусов).

Методы ИГХ

Существует два основных иммуногистохимических метода: прямой и непрямой.

При прямом методе маркированные антитела связываются непосредственно с выявленным веществом (антигеном), а при непрямом методе с антигеном сначала связываются немаркированные первичные антитела, а уже после эту связь выявляют с помощью вторичных антител с метками, для которых первичные антитела являются антигенами.

Непрямой ИГХ метод имеет ряд преимуществ перед прямым, поэтому в настоящее время в диагностике используется именно он. К этим преимуществам можно отнести: многократное повышение чувствительности определения антигена; снижение количества антител, требуемых для проведения исследования; более быстрая реакция (около 3 часов).

Примеры иммуногистохимических исследований животных