Пересмотр гистологических препаратов в ветеринарии, или Пересмотр стёкол без стёкол

Пересмотр стёкол — распространённое явление в гуманной медицине, позволяющее снизить процент ошибочных диагнозов. Его суть заключается в повторном исследовании микропрепаратов другим специалистом-патоморфологом для получения независимого диагноза в случае, когда врач не до конца уверен в результате исследования или клиент сомневается в поставленном диагнозе и хочет услышать, так называемое, второе мнение (second opinion). Особенно часто необходимость в пересмотре стёкол возникает в онкологии, когда от заключения гистолога зависят выбор способа лечения и прогноз.

Пересмотр гистологических препаратов в ветеринарии делают реже, но подобная практика существует. Коллегиальная оценка образцов, практикуемая в CYTOVET, по сути, тот же пересмотр стёкол.

Подробнее об услуге Второе мнение по гистологии

Раньше пересмотр гистологических препаратов подразумевал под собой только физическую передачу стёкол и/или парафинового блока. Новый врач повторно исследовал препараты под микроскопом, при необходимости делал дополнительные срезы. В этом случае тратилось время на то, чтобы забрать стёкла из лаборатории, где проводилось первое исследование, и передать их другому специалисту, который нередко мог находиться в другом городе. Но прогресс не стоит на месте.

Мы уже писали о том, что в апреле этого года Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США разрешило врачам-морфологам использовать для первичной постановки диагноза цифровые WSI-слайды. Это сканы стёкол в высоком разрешении, которые получают с помощью специального оборудования и программного обеспечения. Такие слайды можно просмотреть на компьютере и при необходимости отправить через интернет хоть на другой конец земли практически мгновенно.

Использование WSI-слайдов значительно экономит время, необходимое для проведения повторного гистологического исследования, и средства, которые раньше тратились на доставку гистопрепаратов. Если слайды качественные, врачу-морфологу не нужен даже микроскоп, чтобы их изучить и составить своё профессиональное заключение. Если программное обеспечение и технические возможности позволяют, сделать это можно даже с помощью смартфона, находясь на Северном полюсе.

В CYTOVET всячески приветствуют, перенимают и используют подобные новшества. С недавнего времени мы используем специальный софт для получения высококачественных сканов цитологических и гистологических препаратов. Используя полученные сканы, мы имеем возможность консультироваться с отечественными и зарубежными коллегами, тем самым расширяя наши возможности и повышая точность диагностики.

Иногда наши специалисты, наоборот, выступают в роли второго эксперта, проводя независимое исследование препаратов, первоначально полученных и оцененных в сторонних лабораториях.

Пример интерактивного WSI-слайда (можно приблизить и перемещаться по слайду с помощью мышки). Скан препарата, полученного методом жидкостной цитологии. Базальноклеточная карцинома у собаки породы далматин.

Случай из практики CYTOVET

Специалисты CYTOVET сделали пересмотр стёкол, которые первоначально исследовали в одной из немецких лабораторий. При этом пациент находился в Эстонии.

Пациент — 8-месячный беспородный щенок, у которого владельцы начали отмечать асимметрию лицевой части черепа и повышение слюноотделение. При этом аппетит и жажда были в норме. С этими признаками они обратились в ветеринарную клинику.

Ветеринарный врач провёл общий и стоматологический осмотр, сделал рентген.

С согласия владельцев было принято решение провести дополнительное гистологическое исследование, чтобы понять природу новообразования. Произвели взятие патологического материала и экстракцию 2 зубов в области поражения, которые вместе с образцом новообразования отправили на гистологию в Германию.

Полученное из Германии заключение несколько озадачило врача. Окончательный диагноз гласил, что у 8-месячного щенка остеосаркома.

Гистологическое заключение из Германии (оригинальный текст)

Gross description

Submitted were four samples. Three were between 0.3 and 1.1 x 0.3 x 0.3 cm, beige in colour. The other one, was 2 x 1.8 x 1.5 cm and a decalcifying process was done before the processing of the sample. Sections from each sample were embedded for histological examination.

Histological description

The following staining was performed according to standard operation procedures: H&E.

On the sections examined, a mass originating from spindle cells was found. The mass was poorly demarcated, unencapsulated, moderately cellular and growing invasively into the mandibular/maxilar bone and surrounding periost. The cells were round to spindle shaped and were organised in sheets, and bundles in a scant amount of stroma. There was moderate to marked anisocytosis and anisokaryosis. Th mitotic index was low (1-2/40X HPF), with presence of atypical mitoses. Also, multinucleated cells were frequently found.

Multifocally there was presence of osteoid matrix and trabecular formation.

Invasive growth into the surrounding tissue was found.

After longer decalcification, a section of a tooth was examined. In this section, there was invasive growth of the same neoplastic population within the pulp of the tooth, also producing multiple areas of osteoid matrix, partially mineralized in some cases.

Since only pieces of the mass were submitted, tumor margins could not be evaluated.

Diagnosis

Malingnant madibular/maxilar neoplasm, compatible with osteosarcoma, with invasion of the tooth pulp.

Critical report

The histological examination revealed the presence of a malignant neoplasm, compatible with an osteosarcoma.

Osteosarcomas are malignant tumors originating from bones, and are the most common primary neoplasm of the appendicular skeleton in dogs and cats.

The appendicular skeleton is 3-4 times more often affected as the axial skeleton. Within the axial skeleton, 50 % of the tumors occur in the head bones, and 50 % in the ribs, vertebrae and pelvis.

Independent of the degree of differentiation, osteosarcomas cause early metastases to the lungs and regional lymph nodes. In addition, they grow invasively.

Therefore, the prognosis is poor.

Complete resection (if possible) and monitoring of the regional lymph nodes would be recommendable.

Гистологическое заключение CYTOVET

По представленным фрагментам микрофото картина опухоли повышенной клеточности, клетки мелкого и среднего размера, округлой, овоидной и веретеновидной формы, с анизоцитоз и анизокариоз, выраженным умеренно. Встречаются единичные фигуры митозов, некрозов не отмечается. В некоторых микрофото выявляются фокусы формирования остеоида (в малом количестве).

Гистологические признаки могут согласовываться с картиной остеосаркомы — Osteosarcoma (OS).

Рекомендовано

Иммуногистохимическое исследование на компонент остеосаркомы CK, SMA, GFAP, alkaline phosphatase (AP). Более подробно по ссылке — journals.sagepub.com.

Дифференциальный диагноз

Необходимо провести дифференицальную диагностику с примитивной нейроэктодермальной опухолью (peripheral primitive neuroectodermal tumors pPNET/саркома Юинга/Ewing’s sarcoma (EFT)) с помощью маркеров FLI1(?) и NSE, для собак отмечена отрицательная реакция на CD99 в большей части клонов. Более подробно по ссылке — journals.sagepub.com.

Пояснение

Данный тип опухоли имеет большой спектр схожих по своей морфологии патологических процессов, особенно, в молодом возрасте, которые необходимо идентифицировать с применением ИГХ. Ниже приведены данные из гуманной медицины.

Immunohistochemistry is essential as the family of small round cell tumors is rather large and includes non-Hodgkin lymphoma, neuroblastoma, rhabdomyosarcoma, mesenchymal chondrosarcoma, retinoblastoma (Rb), and desmoplastic small round cell tumor (DSRCT). Other tumors can also show small round cells and these are osteosarcoma, synovial sarcoma, malignant peripheral nerve sheath tumor, and melanoma. Более подробно по ссылке — www.ncbi.nlm.nih.gov

Рекомендована клинико-инструментальная верификация с оценкой инвазивного характера (по данным КТ).